安徽耀坤生物科技有限公司

【实验目的】

1. 观察不同刺激强度对肌肉收缩的影响，从而掌握阈刺激、阈上刺激和刺激等概念。
2. 观察不同刺激频率对肌肉收缩的影响，从而了解强直收缩的机制。

【实验原理】

     一条干是由许多兴奋性不同的纤维所组成的。保持足够的刺激时间不变，刚好能引起其中兴奋性较高的纤维产生兴奋，表现为受这些纤维支配的肌纤维发生收缩，此时的刺激强度即为这些纤维的阈强度，具有此强度的刺激叫阈刺激。随着刺激强度的不断增加，有较多的纤维兴奋，肌肉的收缩反应也相应逐步强度超过阈值的刺激叫阈上刺激。当阈上刺激在到某一值时中所有纤维均产生兴奋，此时肌肉做收缩。在继续增强刺激强度，肌肉收缩反应不再继续将引起肌肉收缩的刺激强度的刺激称为刺激。不同频率的电脉冲刺激时，肌肉会产生不同的收缩反应。若刺激频率较低，每次刺激的时间间隔超过肌肉单次收缩的持续时间，则肌肉的反映应表现为一连串的单收缩；若刺激频率逐渐增加，刺激间隔逐渐缩短，肌肉收缩的反应可以融合，开始表现为不完全强直收缩，以后成为完全强直收缩。

【实验对象】

 蟾蜍。

【实验*材】

蛙类解剖手术*材、蛙钉、林格液、铁支架、活动双凹夹或微调固定器、张力换能器、培养皿、ZL-620生物信号采集处理系统。

【方法和步骤】

1. 制备在体或离体腓肠肌标本
2. 实验装置

（1）采用离体腓肠肌标本时，将肌动*固定在铁架台的微调固定器上，且与换能器平行，并把标本中预留的股骨固定在肌动器上，采用在体腓肠肌标本时，可省略此步骤。

（2）将张力换能*（50g量程）用活动双凹夹或微调固定*固定在支架上，换能器与桌面平行，腓肠肌的跟腱结扎线固定在张力换能*的上，结扎线与桌面垂直。调节微调固定器的上下转钮，使连线不宜太紧或太松，保持有一定的前负荷。

（3）把放在刺激保护电上，保持与刺激电接触良好。ZL-620生物信号采集处理系统的刺激输出连接保护电启动ZL-620生物信号采集处理系统。

3. 实验观察

（1）不同刺激强度对腓肠肌收缩的影响

1）点击ZL-620菜单“实验/常用生理*实验”,选择“刺激强度对骨骼肌收缩的影响”，设置放大*、采样和参数（表2-2-1），刺激模式也可采用单刺激或主周期刺激，逐步改变刺激幅度。

表2-2-1  ZL-620放大*、采样和参数表

2)逐渐刺激强度，找出刚能引起肌肉出现微小收缩的刺激强度（阈强度）。继续增强刺激强度，观察肌肉收缩反应是否也相应继续增强刺激强度，直至肌肉收缩曲线不能继续升高为止。找出刚能引起肌肉出现收缩的刺激强度，即刺激强度。

（2）不同频率对腓肠肌收缩的影响

1）点击ZL-620菜单“实验/常用生理*实验”，选择“刺激频率对骨骼肌收缩的影响”，设置参数（表2-2-2），刺激模式可采用串刺激。

表2-2-2  ZL-620放大*、采样和参数表

2）选用刺激强度刺激，使刺激频率按1、6、11、16、21、26、31 Hz逐渐增加，分别记录不同频率时的肌肉收缩曲线，观察不同频率刺激时的肌肉收缩变化，从而引导出单收缩、不完全强直收缩和完全强直收缩。

【实验结果】

骨骼肌收缩包括收缩和舒张两个时期，测量值主要有：峰值值）、张力增量（发展张力）、收缩新时期和舒张1/2间期（图2-2-4）。

1. 统计全班各组的结果，以平均值&plun;标准差表示，绘制不同刺激强度与腓肠肌收缩张力增量的关系曲线。
2. 统计全班各组的结果，以平均值&plun;标准差表示，绘制不同刺激频率与腓肠肌收缩张力增量时）的关系曲线。
3. 将观察到的结果打印输出或描画于实验报告上。

【注意事项】

1. 在制备离体肌肉标本及实验操作过程中，要不断滴加林格液，以防标本干燥而丧失正常生理活性。
2. 操作过程中应避免牵拉和手捏或夹伤肌肉。
3. 每次刺激之后必须让肌肉有一定的休息时间，特别是在观察刺激频率的影响时。
4. 找准刺激强度，不能刺激过强而损伤**。
5. 实验过程中保持换能*与标本连线的张力不变。